Besteht das zu untersuchende Ausgangsmaterial aus RNA, so muss es für die PCR zunächst mithilfe eines Enzyms (Reverse Transkriptase) in DNA umgeschrieben werden. Üblicherweise erfolgen Reverse Transkription und PCR in zwei verschiedenen Schritten. Die One-step PCR ermöglicht es jedoch, beide Vorgänge in einem Reaktionsansatz zusammenzufassen.
