Differenzierungsfärbung mit hohem taxonomischen Wert. Wichtigste Färbung der Routinediagnostik zur Unterscheidung von gramnegativen und grampositiven Bakterien. Die Färbung erfolgt mit Gentiana- oder Methylviolett und die Beizung mit Lugol’ Lösung. Dadurch entsteht in der Zelle ein Farbe-Iod-Komplex (Gramkomplex). Hierfür sind die Zellwandkomponenten wie Murein, Teichonsäure und Polysaccharide von Bedeutung. Während sich gramnegative Bakterien durch Alkohol wieder entfärben lassen, hält die Mureinschicht der grampositve Bakterien den Gramkomplex fest. Nur die entfärbten, gramnegativen Bakterien nehmen anschließend den roten Farbstoff der Gegenfärbung (Carbolfuchsin) an.